Western blot——从黑白条带to组合SCI图
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阅读： 2022/4/19 17:37:50
背景介绍
最近在做WB的实验，发现自己以前也没有写过相应的帖子，所以就着手写一篇关于从拿到WB的图，到最后的SCI组合图的帖子。希望对大家的WB数据分析有所帮助！也祝大家WB顺利出结果！
软件介绍
[软件名称]：FIJI或者ImageJ
[软件名称]：AI2021
[软件名称]：Origin2022（也可使用其他软件皆可以）
[软件名称]：Excel2019
[WB]：FIJI或者ImageJ内置
AI进行条带组合
1.AI新建画板设置相应名称，颜色模式，以及对应ppi或者dpi
2.将自己实验做出来的放进去AI，这里我用的是一张软件自带的。拖拽进去，首先将嵌入AI
3.使用矩形工具，将最下面的内参框选起来，如果出现了白色，将填充颜色设置为无填充即可
4.选中左边的选框和条带，Alt+鼠标移动，即可出现一模一样的图形
5.将右边的选框挪动，选中第二个条带
6.同理，选中第三个，进行复制平移。同时，选中黑色框框，复制对应的三个在下边备用
7.选中第一个的和选框，右击，建立剪切蒙版
8.同时将最下面的黑色选框将其对其，右击，编组
9.其他两个同理。
10.选中三个将其进行对其：水平居中，纵向分布
11.使用文本工具，添加上对应的指标名称即可
12.成图了
FIJI/ImageJ对条带进行积分
1.打开FIJI/ImageJ，打开一个Excel，将拖拽进去FIJI
2.首先对条带转置为8-bit
3.进行矫正背景
4.一般直接点一下Auto就行了
5.也可以通过手动设置对比度
6.直接使用矩形工具，对图形进行积分
7.然后再选择Plot Lanes
8.出现波浪线之后，对图形进行封口，记住是封口，一定要封紧。这种采用直线封底的方法，其实是扣除了背景值的。因为在曲线上，纵坐标值只有显著高于背景值才会出峰。
9.使用魔棒工具，点击封口的部分，就会出现相应的面积
10.将数值复制到Excel中
11.同理，将上面两条带，按照上述步骤进行，得到数据，放在Excel中
12.将指标的数值除以对应的内参数值，即可得到相对数值，也就是作图用的数值。目前这是一次实验的结果，那么一般情况，我们最少得重复三次实验，才能拿着数据去统计。
13.第二次和第三次做完实验后，按照上述进行数据处理即可，得到三组可以用来作图的数据。
Origin进行作图
1.打开Origin软件，我们先来做Ras的指标，将数据整理一下：将Ras的数据放在一起
2.复制进去Origin软件
3.对数据按照列进行统计
4.一般选择均值和标准差就行
5.复制均值和标准差进行绘图即可
Origin进行绘图
1.右击Origin的下方，插入表格
2.将每组的数值复制进来，并将Sd设置为y误差
3.选中数据，点击柱状图
4.对图形标签和颜色进行设置，哪里需要设置，点哪里，最终柱状图就成型了。
5.柱状图的**好像还没有添加，一般常用的有t检验或者单因素方差分析，统计结果分析出来直接进行添加即可。这里我们使用Origin进行单因素方差即可。
Origin做单因素方差分析的内容可以参考下方：
数据的描述统计和正态性检验
Origin如何做单因素方差分析
Origin如何进行非参数检验并作图
6.最后我们将图形使用AI软件组合在一起即可
7.怎么样，赶紧来试试吧！
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